[Biologia] Anticuerpos, cap. 7

Uso de anticuerpos

-la inmunomarcacion puede darse mediante la asociacion molecular de anticuerpos con elementos fluorescentes, radiactivos, electrodensos o por spin (giro)

la estructura principal de los anticuerpos es su especificidad elevada, por lo que solamente se unen a un antigeno o blanco

Existen 2 tipos de anticuerpos de acuerdo al modo de obtencion:

• Policlonales: Son obtenidos del plasma al animales (cabras/conejos) preuzamente? inoculados con el antigeno purificado posterior a la moculacion se espera unos dias para que sinteticen los anticuerpos mediante los linfocito B obs: como estos anticuerpos son producidos por diferentes colonias de linfocito B, se los llama policlonales.
• monoclonales: Los linfocitos no fusionados mueren fuera del organismo y las celulas de mieloma mueren por carecer de una enzima transferasa que es la que permite metaholizar el HAT. Esta enzima se encuentra en la los linfocitos normales

La inmunomarcacion puede ser:

• directa: En ella se una un anticuerpo marcado para detectar un Antigeno
• Indirecta: En ella se una un AC 1rio No marcado contra el Ag, luego se agrega un AC 2rio (anti-Ac) marcado contra el Ac1rio. Esto mejora la sensibilidad del proceso
• Fibronectina:

-Glicoproteina heterodimerica, formada por 2 cadenas unidas y puentes disulfuro

-cada cadena esta formada por 30modulos B.laminares, agrupados en 5 o 6 Dominios

• Laminina:

-Glicoproteina heterotrimerica con forma de "cruz".

 

#Laminina y fibronectina son importante

punto de fijacion p/mantener a la celula en su posicion a para favorecer su migracion si son moviles (ej: Leucocitos y celu. embrionares)

 

Cap.7

interaccion entres las celulas y su ambiente 세포와 환경 간의 상호 작용

• Matriz Extracelular 세포 외 기질

주로 동물의 구조적 지지등을 담당하는 조직. 세포외기질은 동물의 결합 조직에 속한다. 세포외기질은 세포 사이의 기질과 기저막으로 구성된다.

 

• Red de proteinas y carbohidratos que sirve a la celula anormal? de sosten mecanico, donde puede sujetarse o presentar movimientos de arrastre (mov. ameboide o quimiotaxis)

 

*아메바 운동(amoeboid movement)은 원형질의 유동에 따라 몸체 일부에 위족(僞足)을 만들어 움직이는 행동을 말한다.

*chemotaxis(quimiotaxis)화학쏠림성, 화학주성: 물질을 향해 이동하는 성질을 말한다.

 

정상적인 세포의 구조적 지지를 제공하는 단백질 막과 탄수화물-> 잡아 당기거나 끌리는 움직임이 있을 수 있음(아메바운동, 화학주성)

 

• Contiene señales químicas que permiten el desarrollo y supervivencia celular 세포의 성장, 생존을 가능하게하는 화학적 신호를 가진다!

 

-2 modelos:

 

Matriz extracelular propiamente dicha del tej. Conjuntivo (ECM) 결합조직을 위한 세호 외기질(ECM)	Matriz Extracelular del tejido Epitelial (lamina o membibasal) 상피조직의 세포 외 기질
-tejido conjuntivo 결합 조직 -Rodea completamente a la celula 세포를 둘러싼다 -composicion: 구조 colagenos tipos I,II y III 콜라겐 1,2,3 proteoglicanos grandes (ej: agrecano) 프로테오글리칸 (큰 사이즈!) Glicoproteinas de adhesion (ej: Fibronectina) 접착 당단백질 (피브로넥틴!) otras proteinas: Elasticas 엘라스틱	-esta en contacto solo con la membrana plasmatica basal 원형질막과만 연결 되어 있다! -composicion: 구조: colagenos tipos IV Y VII 콜라겐 4, 7 proteoglicanos pequenos (ej: Perlecano y Agrina->Heparan sulfate proteoglycan에 속한다) 작은 사이즈의 프로테오글리칸 Glicoproteinas de adhesion (ej: Laminina) 접착 당단박질 (EJ 라미닌:기저막의 한 부분인 기저 라미나의 주요 단백질로 대부분의 세포와 기관의 단백질 네트워크의 기반이다.) otras proteinas: entactina

 

[meet 일반생물학] 1-3. 세포의 구조 - 미세섬유, 중간섬유, 세포벽, ECM(콜라겐, 피브로넥틴, 프로테

Colageno 콜라겐

Glicoproteina Fibrosa homo o heterotrimerica 일종,또는 이종삼합체 섬유성 당 단백질

Es exclusiva del reino animal y es la proteinas mas abundante del cuerpo humano

동물계 전용이며 인체에서 가장 풍부한 단백질( 전제단백질 비율의 25%를 차지!)

Es extracelular y tiene funcion estrutural, que resiste las fuerzas de traccion. 그것은 세포 외에 존재, 인장력에 저항하는 구조적 기능을 .가진다

Estructura:

-esta formada por 3 cadenas polipeptidicas ricas en Gly, Pro, Lys y aa modificados como HyI (hidroxilisina) e HyP (hidroxiprolina)

-cada cadena polipeptidica es α- helicoidal y las 3 se entrelazan entre si

ej: cologeno tipo 2

-295nm de largo, 1,5 nm de alto

-1 molecula o Fibrillo de colageno ( Tropocolageno o colageno "monomericos")

 

#La Hyp y la Hyi son derivados de la oxidacion de Pro y Lys en una rxn? mediada por Vit C (ac. ascorbico). Esta modificada resistencia al colageno.-> 여러가지 병을 일으키기도 함

#Los colagenos tipo I, II y III se llaman "colágenos fibrilares" y pueden asociarse en gran cantidad formando las llamadas fibras colagenas estriadas

#Fuerzas que mantienen la estructura del colageno y de la fibra estriada

-puentes de H entre Hyl y Hyp mantienen unidas a las cadenas α de 1 molecula.

-enlace covalente entre Hyl y Lys mantiene unidas a las moleculas de una fibras estriada.

#Existen unos 27 subtipos (isoformas de colageno; solo los 3 primeros son fibrilares

El resto son llamados "NO FIBRILARES", estos poseen una region central NO HELICOIDAL y NO forman fibras estriadas  =>   ej: colageno tipo IV

#Los colagenos tipos VII : forman haces pequenos fibras ancladores.

#Los colagenos de la cornea del ojo se disponen en "lamina contrachapada" dando una estruct. transparente

 

Proteoglicanos

Macromoleculas exclusivas de animales formadas por una proteinas fibrosa central unida covalentemente a GAGs- sulfatados.

(ej: Agrecano de la ECM Y Percano de la lamina basal)

 

Fibronectina 피브로넥틴

• Proteina fibrosa heterodimerica, utilizado para la adhesion entre células y matriz en tej. conjuntivos y en medios de cultivo 이중중량체 섬유 단백질, tej. 결막 및 배양 배지
  
• Posee estructura modular (posee varios dominios FN B_laminares repetidos)
• Estructura...

obs.

# Algunos modulos Fn (B_laminares) poseen una region al azar con la secuencia Arg_ Gly_ Asp (Asas RGD), Para unirse a la INTEGRINA, una proteina de la M.P.

 

asas RGD:

• SITIOS de union a celulas a integrina
• estan en el Dominio Funcional mas grande de la Fibronectina

 

Laminina:

• Es otra glucoproteina de adhesion celular y es propia de la lamina basal epitelial. 세포접착을 돕는 다른 당단백질, 상피 기저층에서만 볼 수 있음
• Es un heterotrimero con forma de "cruz" "십자"모양의 이종삼량체

obs: La fibronectina y la Laminina forman "senderos moleculares" que guian la migracion de celulas embrinarias.

obs : 피브로넥틴과 라미닌은 배아 세포의 이동을 안내하는 "분자 경로"를 형성한다

Celular de la cresta Neural -> migracion guiada por la fibronectina

신경 문장 세포-> 피브로넥틴 유도 이동

Celular del saco vitelino -> migracion guiada por la Laminina

난황낭 세포-> 라미닌 유도 이동

 

 

Metaloproteinasas de la matriz (MMP)

 

Las MMP son proteinas secretadas al medio extracelular o asociada a la m.p.

Esta familia encimatica se caracteriza por poseer ZINC como grupo prostetico.

LA MMP participa en

• modelado del MEC durante el desarrollo embranoico
• migracion celular
• renovacion del tejido
• reparacion tisular luego de lesion histica

obs. Participan ademas de TRASTORNO como la artrosis o lesion gingial

 

7.2 PROTEINAS CELULARES DE UNION

 

->PUEDEN clasificarse en proteinas de union

> celulas -Matriz (integrinas, BP180)

> celulas- uniones

(Cadherinas;tipicas, especiales로 나뉜

(superfamilias de las inmunoglobulinas IG (igSF)

(Claudinas/ocludinas)

 

PROTEINAS DE UNION cel-Matriz

-integrinas: son proteinas heterodimericas conformados por los subunidades alfa y beta

existen diferentes tipos de subunidades de integrinas

->alfa presenta 18 tipos

->presenta 8 tipos

 

obs. solo existen cerea de 24 combinaciones de integrinas

Los subunidades mas comunes son la B1, presente en 12 tipos de integrinas y la alfa v, presente en 5 tipos de integrinas.

La integrina(son proteinas integrales) presenta 3 dominios

->intercelular

->transmembranas

-> extracelular

 

obs: El dominio intracelular de las integrinas presenta 20 a 70 residuos, generalmente la subunidad B es mas larga, alcontando el nro maximo de residuos le integrina B4, la que presenta un dominio interno de 100 residuos.

 

La integrina se asocia por fuera a componente de la MEC

-> fibromectina

-> laminina

-> colageno

->prteoglicanos

 

la asociacion puede ser mediante: RGD O NO RGD

 

Por dentro, la integrina puede asociarse a elementos del citoesqueleto mediante proteinas adoptadoras, la mas importante es la TALINA!

 

LA INTEGRINA no solo es proteina de union sino que tambien es un receptor de senales, de un sistema de senalizacion llamado MECANOTRADUCCION

 

PUEDE SER:

a) de adentro hacia afuera:
estimulo	respuesta
ex: contacto con la Talina	activacion y union a mec
b) de afuera hacia adentro:
union a MEC	reorganizacion del citoesqueleto y regulacion genica

 

 

EXISTEN 2 TIPOS DE UNION CELULA-MATRIZ:

-ADHESION FOCAL

-HEMIDESMOSOMAS

 

adhesion focal:

-propia de celulas

-> conjuntivas (ej. fibroblastos)

-> moviles (movimiento a meboideo, ej: Leucocitos)

-> en CULTIVO

 

Hemidesmosomas:

->son las uniones celula- matriz mas fuertes y resistentes

->tipicas de celulas epiteliales.

 

obs: los componentes del hemidesmosoma pueden ser el origen de enfermedades...

->Hereditarias: Epidermolisis ampollosa

->Autoinmunitarias: Penfigoide ampolloso.

 

UNIONES INTERCELULARES: las uniones celula-celula pueden ser

UNIONES TRANSITORIAS	uniones Leucocito endotelio (selectina/ Glucoproteina)
	uniones Leucocito endotelio (integrina/ IgSF)
	adhesion plaquetaria (integrina/ fibrinogero)
UNIONES ESTABLES	UNIONES NERVIOSAS mediadas por IgSF
	UNIONES OCLUSIVAS mediadas por Claudina/ocludina
	UNIONES ADHERENTES mediadas por Cadherinas Tipicas
	Desomosomasmediadas por Cadherinas especiales
	Uniones Comunicantes mediadas por conexinas

 

1. uniones Leucocito endotelio (selectina/ Glucoproteina)

- Los leucocitos deben salir de la sangre hacia los tejidos que deben defender/reparar

- por ello deben salir del torrente sanguineo rodando sobre las celulas endoteliales de los vasos sanguineos

 

2. uniones Leucocito endotelio (integrina/ IgSF)

-son utiles para permitir que el leucocito pase entre las celulas endoteliales

 

diapedesis -> paso del leucocito entre las celulas endoteliales (sangre -> tejido)

 

 

<IgSF>

• v-cam
• I-cam

->SUPERFAMILIA DE INMUNOGLOBULINA

 

#otro miembros de las IgSF son las NCAM y L1 (en neuronas). Pero estas se unen a otro identicas (son homotipicas) y NO A INTEGRINA (no son heterotipicas)

 

<uniones heterotipicas>

v-cam - integrinas α4B1

I-cam - integrinas α4B2

 

Agregacion Plaquetaria:

Es la union entre plaquetas que ocurre para formar el coagulo, destinado a detener una hemorragia. Estas uniones dependen de integrina y de la proteina MAS GRANDE  del plasma sanguineo, el FIBRINOGENO

(FIBRINOGENO : Al igual que la fibronectina, interactua con INTEGRINA mediante ASAS RGD!)

 

-UNIONES INTERCELULARES ESTABLES:

ej: celula epitelial

 

obs: las adherinas son Ca dependientes. Este ayuda a mantener organelos las posiciones extracelulares

los cadherinas son muy importantes para el desarrollo embrionario y la diferenciacion celular.

Las celulas pueden ser variando la expresion de dicha proteina

ej: Gastrulaccion -> ocurre la transformacion de celulas embrionarios? en 3 tipos de tejidos

los cuales son:

-ecto...

 

las celulas del epiblasto expresan cadherinas tipos E (epitelial)

durante la gastrulacion, un grupo de celulas del epiblasto dejan de expresar dicha cadherina e imcion una migracion hacia el medio entre el epiblasto y el hipoblasto. Estas celulas pasan a denominarse mesenquimdes

 

-uniones adherentes

obs. las cateninas no solo tienen  funcion estructural sino que tambien participan en la regulacion celular

->la catenina α regula la formacion de la union

-> la cateninas B y pro? participan en la transmision de senales hacia el citoplasma o el nucleo

 

Desmosomas

Este tipo de union es similar al hemidesmosoma, con la diferencia que presenta cadherinas especiales en lugar de la integrina y Bp 180

las cadherinas especiales son la desmogleina y la dimocolina

las cadherinas estan asociadas a una placa proteica de 1Mm de diametro formada por proteinas asociadas a filamento intermediarios, los cuales son la diomoplaquina y la placoglobina

 

obs. A diferencia de las cadherinas tipicas, las especiales son heterodimericas

la union que se da entre subunidades de cadherinas especiales es heterotipica

 

la union de proteinas del mismo tipo se denomina homotipica cuando la union es entre proteinas diferentes se denomina homotipica

ej-> integrina- fibronectina (heterotipica)

cadherina N - cadherina N (homotipica)

 

Union de oclusion

se encuentra formada por 2 tipos de proteinas

-> Claudinas (principales)

-> ocludinas (accesorias)

ambas proteinas son integrales con 4 segmentos trasmembranosos un dominio intracelular y un dominio "extracelular" virtualmente inexistente

Son proteinas que hermetizan? el espacio intercelular separando asi 2 compartimiento, lo que evita la difusion de sustancias de forma intercelular.

Se presentan en forma de bandas o cinturon en todo el perimetro celular. A mayor numero de bandas mayor es el hermetismo y la impermeabilidad

 

desde interacciones entrecelulas~

hasta7.5 266p(pared celular no!)

 

otras uniones intercelulares

• nanotubos de tunelizacion: son comunicaciones directas celula-celula, presentes en ciertos tipos celulares y permiten compartir IONES, NUTRIENTES e incluso MACROMOLECULAS.

 

• Plasmodesmos: Son amplias comunicaciones intercelulares que atraviesan la pared celular vegetal y comunican 2 celulas vecinas.

 

 

 

Hasta 50KDa

 

 

 

 

De las siguientes NO es función de la cubierta celular: a)     Protección Mecánica b)    Protección química c)     Interacción celular d)    Unión a factores reguladores e)     Metabolismo de aminoácidos (metaboliza la proteina!!!)

Podemos encontrar lamina basal recubriendo completamente a: matriz extracelular se recubre... compartimientos!!! intestino->epideriales!! f)     Células epidérmicas g)    Células musculares h)    Enterocitos i)     Células respiratorias j)     Todas son correctas

La lamina basal podría alcanzar una de las siguientes medidas k)     10nm         b) 500nm       c) 600nm          d) 200 µm     e) 0,2 µm (

Marca la afirmación incorrecta: l)     Todas las moléculas de colágeno son trímeros m)   La mayor parte de las moléculas de colágeno forman fibras n)    La deficiencia de vitamina C produce inflamación de tejidos o)    No  todos los colágenos poseen las mismas subunidades p)    Un mismo tejido puede tener diferentes tipos de colágeno

El aumento de la fragilidad ósea que acompaña al envejecimiento normal puede darse a consecuencia de: q)    Disminución de las interacciones entre proteínas de la ECM r)     Un proceso que inicia en la etapa adulta y dura algunos años s)     La formación excesiva de puentes de hidrogeno t)     La formación de enlaces covalentes entre proteínas de la ECM u)    Por aumento de la actividad de células líticas

Uno de los siguientes no se corresponde con su par: v)     Colágeno tipo I/ enanismo w)    Colágeno tipo II/ enanismo x)     Colágeno IV/ Síndrome de Alport y)     Colágeno I/ ontogénesis imperfecta z)     Colágeno III/ Ehlers Danlos

Teniendo en cuenta a los glucosaminoglucanos marca la afirmación correcta: pag. 241p (figura 139.) a)  El componente proteico es más prominente-> no tienen proteinas!! b)  El ácido hialuronico es el que más proporción proteica posee ->no c)   El condroitín sulfato solo posee sulfato como grupo acido -> carboxilo tmb posee sulfato d)  El sulfato de queratano solo posee sulfato como grupo acido e)  Los GAGs se unen mediante uniones N glicosídicas al componente proteico -> o glicosidicas tmb!

Tiene capacidad para formar celosías f)   Colágeno I g)  Colágeno II h)  Colágeno III i)   Colágeno IV

Teniendo en cuenta a la Fibronectina maque la opción correcta: j)   El dominio de unión celular presenta mayor peso molecular k)  Las cadenas se relacionan mediante interacciones no covalentes ->son covalente, puente disulfuro!! ll)  El dominio de unión a colágeno es el más repetido ->fibrinogeno? m) Cinco o seis módulos Fn se agrupan para formar 30 dominios diferentes n)  Ninguna es correcta (242. figura 110?)

Marca la opción correcta o)  La integrina es un homodímero formado por 1 subunidad alfa y otra beta ->en la flaqueta! p)  El dominio extracelular de la cadena beta de la integrina es mucho más largo que el de la cadena alfa q)  Cada subunidad de la integrina atraviesa la membrana 2 veces r)   Generalmente la cadena beta presenta mayor longitud s)   2 son correctas

La activación de la integrina αIIbβ3 ocurre a nivel………… con lo que adopta su conformación………… y aumenta su afinidad por…………………: a)    Citoplasmático- extendida- fibrinógeno b)    Extracelular- extendida- fibrinógeno c)     Citoplasmático- flexionada- Fibronectina d)    Extracelular- flexionada- Fibronectina e)    Citoplasmático- extendida- VCAM

En relación a la talina: a)     Se une al dominio citoplasmático de la subunidad alfa b)    Activa a la integrina mediante el acercamiento de las cadenas de esta c)     Cuando se une al dominio extracelular inactiva a la integrina d)    Se une a la subunidad beta de la integrina y modula su función e)     2 son correctas

Es componente de la unión célula matriz a)     IgSF         b) Cadherinas        c) Cateninas         d) BP180  e) L1

Utilizan fibronectina durante la migración celular en la embriogénesis: t)    Células linfoides u)  Células elitroides v)  Células de la medula suprarrenal w) Células germinales x)  Ninguna es correcta

Presenta mayor número de isoformas y) Integrinas z) BP180 a) Selectinas b) IgSF c) Cadherinas